Wilhelminenspital der Stadt Wien
Zentrallabor und Blutbank
Thrombozytenkonzentrate:
Pool-TK versus
Apherese-TK
Gabriele Stiegler
Zentrallabor und Blutbank
Wilhelminenspital der Stadt Wien
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Pool-Thrombozytenkonzentrate
• 4-6 TK aus Vollblut werden
zusammengeführt
– ABO und RhD ident
• Aus 1 Vollblutspende
=> mehrere Blutprodukte
– Erythrozytenkonzentrat
– Plasmaeinheit
– Thrombozytenkonzentrat
• Zwei Methoden
– Buffy Coat Methode
• Europa, Kanada
– PRP Methode
• USA
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Herstellung
Buffy Coat TK
Vollblutspende – hard spin (1) Plasma
(2) Erythrozytenkonzentrat
(3) Buffy-Coat
Thrombozyten, Leukozyten,
Erythrozyten, Plasma
Buffy-Coat – soft spin Thrombozytenkonzentrat <=
Poolen von 4-6 TK
Resuspension in Plättchen-
additivlösung und Plasma
Leukozytendepletion
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Apherese-TK
• Einzelspende am Zellseparator
– Extrakorporaler Kreislauf
– Zentrifugation und Separation von Blutzellen
– Antikoagulation mit ACD-A
– Leukozytendepletion während des Prozesses
• Hohe Thrombozytenzahlen des Spenders
– Herstellung von Doppel- oder Dreifach-TK möglich
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Pool-TK versus Apherese-TK
Pool-TK
• Aus Vollblutspenden
• Stabilisator
– CPD
• Spendedauer
– Max. 10 Minuten
• Verfügbarkeit hoch
– 1 TK pro 4-6 Vollblutspender
• Rel. kostengünstig
Apherese-TK
• Spende am Zellseparator
• Stabilisator
– ACD-A
• Spendedauer
– Ca. 90 Minuten
• Begrenzte Verfügbarkeit
– Aufwändige Herstellung
• Teurer als Pool-TK
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Der Blutspender Risiken der Blutspende
• Punktion
– Fehlpunktion, Mehrfachpunktionen
– Hämatom, Thrombophlebitis, Nervenverletzung, Pseudoaneurysma
• Vasovagale Reaktionen
– Sofort oder verzögert
– Verletzungen
• Cardiovaskuläre Reaktionen
– Angina pectoris, Herzinfarkt, cerebrale Ischämie
EDQM Guideline 2015.
Guide to the Preparation, Use and Quality Assurance of Blood Components
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Spezifische Risiken
Thrombozytapherese • ACD-A (Zitrat) => Hypokalzämie
– Mild: periorale Parästhesie, Kopfweh, Tremor, Hypotonie
– Schwer: Arrhythmie
– Langzeiteffekte: verminderte Knochendichte
• Kontakt mit Material des Schlauchsets
– DHEP – toxisch?
– Allergie – Anaphylaxie
• Probleme mit Zellseparator
– Blutflussprobleme
– Maschinenprobleme, Luftembolie
• Hoher Thrombozytenverlust
• Thrombozytenaktivierung
• Verlust von Lymphozyten
• Spendedauer H. Schrezenmeier, E. Seifried. Buffy-coat-derived pooled platelet
concentrates and apheresis platelet concentrates: which product
type should be preferred? Vox Sang 2010
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EDQM 2015 Europäisches Arzneibuch-Kommission
...there is an increasing
concern about long-term
effects in donors in intensive
apheresis programmes. This
includes risks associated with
citrate exposure in regular
platelet apheresis donors,
leading to problems with
bone mineral density and
diminished IgG levels after
long-term intensive plasma-
pheresis.
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Spezifikationen
Thrombozytenkonzentrat
• Thrombozytengehalt – 2-4 x10^11
• Lagermedium – Thrombozytenadditivlösung 65%
– Plasma 35%
• Restzellen – Restleukozyten < 1 x10^6
– Resterythrozyten < 0,5 x10^9
• Restsubstanzen v. Pathogenreduktion – Restamotosalen und Photoprod. (Intercept ®)
– Restriboflavin und Photoprod. (Mirasol ®)
• pH > 6,4 am Ende der Lagerung
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Thrombozytenkonzentrat
• Lagerung – Gasdurchlässiger Kunststoffbeutel
– 22 ± 2°C unter permanenter Agitation
– Maximal 7 Tage bei Bakteriendetektion oder –reduktion
• Sichtbare Qualitätskriterien – Bernsteinfarben
– „Swirling“ Phänomen
– Keine sichtbaren Aggregate
• Transfusion – Umgehend nach Anlieferung
– Transfusionsfilter
– Transfusionsdauer ca. 30 Minuten
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Thrombozytengehalt
H. Schrezenmeier, E. Seifried „Buffy-coat-derived pooled platelet concentrates and apheresis platelet
concentrates: which product type should be preferred?“ Vox Sang 2010
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Infektionssicherheit
• Viren: HIV I+II, HCV, HBV, HAV
– Serologische Testung und PCR bei jeder Blutspende jedes Mal
• Kontamination mit Bakterien
– Rel. hohes Risiko für Thrombozytenkonzentrate
• Lagerung in Plasma und bei Raumtemperatur
• Pathogenreduktion aller TK in Wien
– Inaktivierung von allen kernhältigen Zellen
Bakterien, Viren, Parasiten, Leukozyten
– Keine Gamma-Bestrahlung notwendig
– Keine CMV-Testung notwendig
Durch Pathogenreduktion höchste
Infektionssicherheit bei Pool- und Apherese-TK
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Nebenwirkungen
• Febrile nicht hämolytische Transfusionsreaktion
– Durch Zytokine
– Einflussfaktoren: rWBC, Plasmagehalt, Patientenfaktoren
– => Leukozytendepletion vor der Lagerung => rWBC < 1x10^6
• Allergische Reaktion
– Durch Plasmaproteine
– => Reduktion des Plasmagehalts (Thrombozytenadditivlösung)
• TRALI
– Multifaktorielle Ursache (z.B. Antikörper gegen Leukozyten)
• GvHD
– Durch Lymphozyten
– => Gammabestrahlung bzw. Pathogenreduktion
• RhD Alloimmunisierung
– Durch Resterythrozyten
– => RhD negative TK für RhD negative Patientinnen im gebährfähigen Alter
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Refraktärstatus
• Wiederholt inadäquater Thrombozytenanstieg
– Keine einheitliche Definition
• Thrombozytenanstieg (CI)
– 1 Stunden CI < 10G/L
– 24 Sunden CI < 10G/L
• Korrigierter Thrombozytenanstieg (CCI)
– Thrombozytengehalt des TK
– Gesamtblutvolumen und Körperoberfläche des Empfängers
– Verlust von 33% der Thrombozyten im RES
– CCI < 7,5G/L
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Nicht immunologischer
Refraktärstatus • > 90% Ursache nicht immunologisch
• Faktoren des Empfängers
– Alter, Geschlecht, Vortransfusionen
– Splenomegalie
– Therapie mit Antibiotika, Antimykotika, Heparin, Tacrolimus, Cyclosporin
– Fieber, DIC, Sepsis
– Allogene Stammzell- bzw. Knochenmarktransplantation
– Blutung
• Faktoren des Thrombozytenkonzentrates
– Thrombozytengehalt
– Alter des TK
– ABO Kompatibilität
– Qualität der Thrombozyten
– Unterschiede zwischen Spendern
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Immunologischer Refraktärstatus
Alloimunisierung • Antikörper gegen HLA Klasse I (HLA-A, HLA-B)
– Ursache Leukozyten
– Minimierung der Alloimmunisierungsrate
• Leukozytendepletion => Restleukozyten <1x10^6
• Gammabestrahlung => inaktiviert Leukozyten
• Pathogenreduktion => inaktiviert Leukozyten
• Antikörper gegen Plättchenantigene (HPA)
– Meist Anti-HPA-1b und 5b
• (Zirkulierende Immunkomplexe, Autoantikörper, Medikamenten-
induzierte Antikörper)
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Kontakt mit fremden Antigenen durch Transfusion von Blutprodukten
• Pat. mit TK-Transfusionen => meist auch viele andere
Blutprodukte
– Kumulation von Fremd-Antigen-Kontakten durch mehrere Blutprodukte
– Das Ausmaß der Antigenkontaktvermehrung durch Pool-TK wird nivelliert
Thiele, Heddle, Greinacher, NEJM 2013
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Pool-TK? oder
Apherese-TK?
Was sagen die Richtlinien?